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活性保留的時間更長。

鍾教授將提取任務交給了其中一名研究員,研究員迅速的進行著準備工作。

準備工作如下:

1. 第一次使用時,在Buffer W2 concentrate 和Buffer W1B concentrate 中按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。

2. Buffer W2(12x96 試劑盒)配製:在提供的500 ml 空瓶中加入15 ml 10xBuffer W2,135 ml 去離子水和350 ml 乙醇,可用100%無水乙醇或95%乙醇。

3. 根據瓶上標籤將蛋白酶K 溶解於Buffer PK 中,請勿旋渦振盪。

4. 準備70℃溫浴。

5. 使用前檢查Buffer BL 是否有沉澱析出,若出現沉澱,請於70℃溫浴加熱至沉澱完全溶解後再使用。

完成試劑準備工作之後,在鍾教授的首肯之下,研究員開始進行DNA的提取。

具體操作步驟如下:

1. 向96 圓孔板的每孔中加入20 ul 蛋白酶K。

2. 加200 ul 抗凝全血到96 圓孔板中。

~undefined 若全血樣品體積少於200 ul,用PBS 補充到200 ul。

~undefined 若樣品為鳥類血,樣品用量須低於10 ul。

~undefined 若需得到RNA-free 的基因組DNA,在步驟3 加入Buffer BL 前加入DNase-free 的RNase A20 mg/ ml 。

3. 加200 ul Buffer BL ,注意不要打溼每孔的邊緣,用96 圓孔矽膠片密封各孔。

4. 用力混合30 s。

5. 3000 rpm 簡短離心使96 圓孔矽膠片上的溶液到96圓孔板內。啟動離心機,當速度達到3000rpm後即停止。

6. 在培養箱或烘箱中70℃溫浴至少10 min。

7. 3 000 rpm 簡短離心使96 圓孔矽膠片上的溶液到96圓孔板內。啟動離心機,當速度達到3 000rpm後即停止。

8. 取下96 圓孔矽膠片,每孔加入200 ul 乙醇(96-100%)。

9. 用96 圓孔矽膠

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